缓冲液参考中心

 

缓冲液参考中心

• 常见生物缓冲液的pH范围

• Tris缓冲液的制备 - pH vs. 温度

• 磷酸盐缓冲液的制备 - 0.2M溶液

• 柠檬酸 - 磷酸氢二钠缓冲液的配置，pH2.6 - 7.6

• 柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液的配置，pH3.0 - 6.2

• 乙酸钠 - 醋酸缓冲液的配置，pH3.7 - 5.6

• 磷酸氢二钠 - 磷酸二氢钠缓冲液的配置，pH5.8 - 8.0 （25℃）

• 咪唑 - 盐酸盐缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）

• 碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）

• 缓冲液配置公式

 

选择正确的缓冲液

基于酸碱性、解离常数（衡量溶液酸碱性、浓度以及温度的系数）、规格、纯度以及精确的应用领域可帮助您选择一款合适的缓冲液。以下表格通过pH与pKa数据的参考，为您提供一些常用缓冲液的配置方案。

 

缓冲液级别

为满足各种形式的实验需求，我们提供不同纯度与杂质含量的缓冲液试剂。目前有7种不同级别的试剂可以满足基本的实验室需求、帮助建立药品配方与生产、检测痕量金属含量以及生产指定纯度级别的材料。

 

常用生物缓冲的有效pH范围（25℃, 0.1M)

 

名称 有效的pH缓冲范围 pKa（20℃） pKa（25℃） pKa（37℃） 试剂级 更优级别 MES 5.5-6.7 6.16 6.1 5.97 M105074 M274288 Bis-Tris 5.8-7.2 n/a 6.5 6.36 B105639 B113072 ADA 6.0-7.2 6.65 6.59 6.46 A108964 A108965 ACES 6.1-7.5 6.88 6.78 6.54 A100327 A100328 PIPES 6.1-7.5 6.8 6.76 6.66 P105090 P105092 P105093 P105091 MOPSO 6.2-7.6 n/a 6.9 6.75 M113008 n/a Bis-Tris-Propane 6.3-9.5 n/a 6.8，9.0 n/a B299299 n/a B105640 BES 6.4-7.8 7.17 7.09 6.9 B105116 B105117 B105115 MOPS 6.5-7.9 7.28 7.2 7.02 M105135 M274252 M105133 TES 6.8-9.2 7.5 7.4 7.16 T105113 T105114 HEPES 6.8-8.2 7.55 7.48 7.31 H109407 H109408 H109406 DIPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.35 B113022 n/a MOBS 6.9-8.3 n/a 7.6 n/a M120630 n/a TAPSO 7.0-8.2 n/a 7.6 7.39 T113029 n/a Tris 7.0-9.0 8.2 8.06 7.72 T110600 T110602 T110599 T110598 T274227 T274250 T110601 HEPPSO 7.1-8.5 n/a 7.8 6.66 H113003 n/a POPSO 7.2-8.5 n/a 7.8 7.63 P105272 n/a TEA 7.3-8.3 n/a 7.8 n/a T108151 n/a T108154 EPPS 7.3-8.7 n/a 8 n/a H110899 H110901 H110900 Tricine 7.4-8.8 8.16 8.05 7.8 T100351 T118067 T100350 Gly-gGly 7.5-8.9 n/a 8.2 n/a G105429 G119491 G119492 G119491 Bicine 7.6-9.0 8.35 8.26 8.04 B110905 B110906 HEPBS 7.6-9.0 n/a 8.3 n/a H113002 n/a TAPS 7.7-9.1 8.49 8.4 8.18 T108961 T108963 T108962 AMPD 7.8-9.7 n/a 8.8 n/a A106026 n/a TABS 8.2-9.6 n/a 8.9 n/a T329718 n/a AMPSO 8.3-9.7 n/a 9 9.1 A120640 n/a CHES 8.6-10.0 9.55 9.49 9.36 C110897 n/a C110898 CAPSO 8.9-10.3 n/a 9.6 9.43 C105213 n/a AMP 9.0-10.5 n/a 9.7 n/a A140833 n/a A100592 CAPS 9.7-11.1 10.56 10.4 10.02 C105209 n/a C105210 CABS 10.0-11.4 n/a 10.7 n/a C120628 n/a

 

TRIS缓冲液配置指导 - pH vs.温度

 

pH 在不同温度下的变化     g/L  0.5M溶液   5℃ 25℃ 37℃ Tris-HCl Tris base 7.76 7.2 6.91 7.02 0.67 7.89 7.3 7.02 6.85 0.8 7.97 7.4 7.12 6.61 0.97 8.07 7.5 7.22 6.35 1.18 8.18 7.6 7.3 6.06 1.39 8.26 7.7 7.4 5.72 1.66 8.37 7.8 7.52 5.32 1.97 8.48 7.9 7.62 4.88 2.3 8.58 8 7.71 4.44 2.65 8.68 8.1 7.8 4.02 2.97 8.78 8.2 7.91 3.54 3.34 8.88 8.3 8.01 3.07 3.7 8.98 8.4 8.1 2.64 4.03 9.09 8.5 8.22 2.21 4.36 9.18 8.6 8.31 1.83 4.65 9.28 8.7 8.42 1.5 4.9 9.36 8.8 8.51 1.23 5.13 9.47 8.9 8.62 0.96 5.32 9.56 9 8.7 0.76 5.47

 

磷酸盐缓冲液配置指导 - 0.2M 溶液

 

磷酸二氢钾无水物 g/L 磷酸氢二钠七水合物 23℃ pH 磷酸二氢钾无水物 g/L 磷酸氢二钠七水合物 23℃ pH 22.4 3.49 5.7 10.8 29.51 6.9 22.08 4.29 5.8 9.36 32.73 7 21.6 5.37 5.9 7.92 35.95 7.1 21.05 6.6 6 6.72 38.63 7.2 20.4 8.05 6.1 5.52 41.31 7.3 19.56 9.93 6.2 4.56 43.46 7.4 18.6 12.07 6.3 3.84 45.07 7.5 17.64 14.22 6.4 3.12 46.68 7.6 16.44 16.9 6.5 2.52 48.55 7.7 15 20.12 6.6 2.04 49.09 7.8 13.56 23.34 6.7 1.68 49.89 7.9 12.24 26.29 6.8 1.27 50.81 8

 

醋酸-磷酸氢二钠缓冲液配置，pH 2.6-7.6

一水柠檬酸，C6H8O7 ? H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。磷酸氢二钠，MW 141.98； 0.2M 含量为28.40 g/L，或者磷酸氢二钠二水合物，MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。

 

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.2M-磷酸氢二钠混合时

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.2M-碳酸氢二钠 2.6 89.1 10.9 2.8 84.15 15.85 3 79.45 20.55 3.2 75.3 24.7 3.4 71.5 28.5 3.6 67.8 32.2 3.8 64.5 35.5 4 61.45 38.55 4.2 58.6 41.4 4.4 55.9 44.1 4.6 53.25 46.75 4.8 50.7 49.3 5 48.5 51.5 5.2 46.4 53.6 5.4 44.25 55.75 5.6 42 58 5.8 39.55 60.45 6 36.85 63.15 6.2 33.9 66.1 6.4 30.75 69.25 6.6 27.25 72.75 6.8 22.75 77.25 7 17.65 82.35 7.2 13.05 86.95 7.4 9.15 90.85 7.6 6.35 93.65

 

醋酸-柠檬酸钠缓冲液配置，PH 3.0-6.2

一水柠檬酸，C6H8O7 ? H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。柠檬酸三钠二水合物，C6H5O7Na3?2H2O，MW 294.12；0.1M 含量为29.41 g/L。 

 

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.1M-柠檬酸三钠混合时

 

pH X mL 0.1M-醋酸 Y mL 0.1M-柠檬酸三钠 3 82 18 3.2 77.5 22.5 3.4 73 27 3.6 68.5 31.5 3.8 63.5 36.5 4 59 41 4.2 54 46 4.4 49.5 50.5 4.6 44.5 55.5 4.8 40 60 5 35 65 5.2 30.5 69.5 5.4 25.5 74.5 5.6 21 79 5.8 16 84 6 11.5 88.5 6.2 8 92

 

醋酸钠-醋酸缓冲液配置，PH 3.7 - 5.6

醋酸钠，CH3COONa ? 3H2O，MW 136.09；0.2M 含量为27.22 g/L。

 

X mL 0.2M-NaOAc 和Y mL 0.2M-HOAc 混合时

 

 

 

pH，18℃ X mL 0.2M-醋酸钠 Y mL 0.2M-冰醋酸 3.7 10 90 3.8 12 88 4 18 82 4.2 26.5 73.5 4.4 37 63 4.6 49 51 4.8 59 41 5 70 30 5.2 79 21 5.4 86 14 5.6 91 9

 

碳酸氢二钠-碳酸二氢钠缓冲液配置，PH 5.8-8.0  25℃

Na2HPO4 ? 2H2O, MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。Na2HPO4 ? 12H2O，MW 358.22； 0.2M 含量为71.64 g/L。NaH2PO4 ? H2O，MW 138.01；0.2M 含量为27.6 g/L。NaH2PO4 ? 2H2O，MW 156.03；0.2M 含量为31.21 g/L。 

 

X mL 0.2M-磷酸氢二钠，Y mL 0.2M-磷酸二氢钠；用水稀释至100mL

 

pH，25℃ X mL 0.2M-磷酸氢二钠 Y mL 0.2M-磷酸二氢钠 5.8 4 46 6 6.15 43.85 6.2 9.25 40.75 6.4 13.25 36.75 6.6 18.75 31.25 6.8 24.5 25.5 7 30.5 19.5 7.2 36 14 7.4 40.5 9.5 7.6 43.5 6.5 7.8 45.75 4.25 8 47.35 2.65

 

咪唑-HCl 缓冲液配置，PH 6.2 - 7.8  25℃

咪唑，C3H4N2，MW 68.08

 

25mL 0.2M-咪唑（13.62 g/L），X mL 0.2M-HCl，用水稀释至100mL

 

pH, 25℃ X mL 0.2M-HCl 6.2 21.45 6.4 19.9 6.6 17.75 6.8 15.2 7 12.15 7.2 9.3 7.4 6.8 7.6 4.65 7.8 3

 

碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液配置，PH 9.2 -10.8

Na2CO3 ? 10H2O，MW 286.2；0.1M 含量为28.62 g/L。NaHCO3， MW 84.0；0.1M 含量为8.40 g/L。

 

X mL 0.1M-碳酸钠和Y mL 0.1M-碳酸氢钠混合时

 

20℃ 37℃ X mL 0.1M-碳酸钠 Y mL 0.1M-碳酸氢钠 9.2 8.8 9.4 9.1 9.5 9.4 9.8 9.5 9.9 9.7 10.1 9.9 10.3 10.1 10.5 10.3 10.8 10.6

 

缓冲液制备的配方与方式

质量分数（w/v)

（缓冲液所需百分比/100）× 最终缓冲液体积（mL）=  最初所需原料的质量（g）

 

配置摩尔浓度

所需的物质的量浓度 × 分子量 × 溶液最终体积（L) = 所需的质量（g）

 

亨德森-哈塞尔巴尔赫方程